LA MISE EN FECONDATION

Principe général

Les ovocytes et les spermatozoïdes sont mis en présence.

Puis ovocytes et spermatozoïdes sont placés dans un milieu de culture favorable à leur survie et mis dans l’incubateur à 37°C.

J0 Mise en fécondation

Comme nous l’avons vu, deux modes de fécondation sont possibles :

FIV classique : insémination des spermatozoïdes dans l'ovocyte

Chaque ovocyte est mis en présence d’un nombre suffisant de spermatozoïdes mobiles préparés (50 000 à 100 000 spermatozoïdes) avant d’être replacé à 37 °C dans un incubateur.

Après quelques heures, certains spermatozoïdes vont traverser le cumulus et s’attacher à la zone pellucide qui entoure l’ovocyte.

En général, un seul de ces spermatozoïdes parvient à traverser la zone pellucide, atteindre la surface de l’ovocyte et pénétrer dans l’ovocyte.

Schéma d'une fécondation in vitro classique

FIV ICSI : injection d’un spermatozoïde dans l’ovocyte

Préparation de l’ovocyte

Les ovocytes sont débarrassés du nuage de cellules qui les entourent (corona radiata). C’est l’étape de « décoronisation », qui est ensuite parachevée, au moyen de pipettes très fines.

A ce stade, on peut faire le tri entre les ovocytes matures et immatures.

L’ovocyte mature se caractérise par la présence du 1er globule polaire dans l’espace périvitellin (entre la surface de l’ovocyte et la zone pellucide).

L’ovocyte totalement immature présente un grand noyau appelé vésicule germinale.

Injection du spermatozoïde

Seuls les ovocytes matures sont fécondables et pourront être micro-injectés : pour cela, ils sont placés dans une boîte de culture, sous un microscope équipé de deux micromanipulateurs.

Ces micromanipulateurs sont reliés à deux aiguilles de verre appelées micropipettes.

La première est une micropipette de contention et permet d’immobiliser l’ovocyte, la seconde est une micropipette d’injection qui bloque un spermatozoïde et l’introduit dans l’ovocyte (micro-injection)